Histolojik Muayene
Amaç: Bir et ürününde kasaplık gövde
etleri, yağ ve müsaade edilen miktardaki bağ dokusu dışında diğer doku ve
organların katılıp katılmadığının tespit edilmesi amacıyla yapılır.
Prensip: Bir et ürün önce formolde 1
gün tespit edilir, dereceli alkol ve
ksilen serilerinden geçirildikten
sonra parafin bloklara gömülür. Mikrotom
yardımı ile parafin bloklardan kesit alınarak lam üzerine konur, lamelle
kapatılır. Hematoksilen eozin ya da
trikrom boya yöntemleri ile bu lameller boyanır ve daha sonra mikrostopta
incelenir.
Numune alma: Genel şüpheli et ürünü 2-3
cm lik kare şeklinde kesilir ve doku takip kaseti içine konur.
Histolojik Doku Takip Cetveli:
Pazartesi Numune %10 luk formolde 1 gece
bekletilir
Salı 9.00-17.00 Akarsuda bekletme
17.00-9.0
%70 Alkolde 1 gece
Çarşamba 9.00-11.00 %80 Alkolde bekletme (2h)
11.00-14.00 %96 Alkolde bekletme (3h)
14.00-9.00 %100 Alkolde 1 gece bekletme
Perşembe 9.00-10.00 Ksilen I de bekletme (1h)
10.00-11.00 Ksilen II de bekletme (1h)
11.00-12.00 60 oC de Parafin I de bekletme
(2h)
12.00-14.00 60 oC de Parafin II de bekletme
(2h)
14.00-15.00 Parafin
blokların gömülmesi (30dk)
Blok dibe iyice yapışsın yüzeyde kalmasın
15.00-17.00 Deepfrizde
bekletme (Kesit alana kadar deepfrezde saklanır. Alınmayacaksa oda ısısında
saklanabilir.)
Cuma 9.00-11.00 Kesit alma işlemleri (45 oC su
banyosunu) 11.00-12.00 Lama yapıştırılan kesitlerin parafinleri 60 oC
lik
etüvde 1 h de eritilir.
14.00-17.00 Boyama
işlemleri (Trikrom boyama, HxE boyama)
Pazartesi Mikroskobik değerlendirme ve Rapor
yazımı
Boyaların hazırlanması
|
|
Crossman's Trichrome
|
Solutions
|
Solution A
|
|||||||||
|
|
0.3
|
g
|
|||||||
|
|
2.0
|
g
|
|||||||
|
Acetic acid
|
|
1.0
|
mL
|
||||||
|
Water |
|
100
|
mL
|
||||||
|
Thymol
|
|
0.06
|
g (a small crystal)
|
||||||
|
Solution B
|
|||||||||
|
Phosphomolybdic acid
|
|
1.0
|
g
|
||||||
|
Water
|
|
100
|
mL
|
||||||
|
Solution C
|
|||||||||
|
either
|
or
|
||||||||
|
|
2.0
|
g
|
|
|
1.0
|
g
|
|||
|
Acetic acid
|
|
2.0
|
mL
|
|
Acetic acid
|
|
1.0
|
mL
|
|
|
Water
|
|
100
|
mL
|
|
Water
|
|
100
|
mL
|
|
|
Solution D
|
|
|
|
|
|
||||
|
Acetic acid
|
|
1.0
|
mL
|
|
|
|
|
|
|
|
Water
|
|
100
|
mL
|
|
|
|
|
|
|
Hematoksilen Eozin
Boyama
Boya maddeleri: Eosin Y
(Carlo Erba 446634)
Hemotoxylin
cryst (K26696402)
Boyama Yöntemleri
1. Crossman Tricroma Boyama
Ksilol 1 10dk
Ksilol 2 10dk
%100 alkol (etanol) 2dk
%96 alkol 2dk
% 80 alkol 2dk
%50 alkol 2dk
Distile su 2dk
Boya A 1dk
Distile su 2dk
Boya B kollajenlerin
rengi gidene kadar
Distile su 2dk
Boya C 5dk
Distile su 2dk
Boya D diferensiye
olana kadar
Distile su 2dk
%50 alkol 2dk
% 80 alkol 2dk
%96 alkol 2dk
%100 alkol (etanol) 5dk
Ksilol 1 10dk
Ksilol 2 10dk
Ksilolden çıkınca ıslakken lam üzerine cam bagetle1 damla
entellan damlatılır. Lamel 30 derece açı ile üzerine kapatılır. Üzerine kurşun
ağırlık konur.
Entellanı küçük bir kaba koy büyük şişede donabilir.
Tüm bu solusyonlar şalelerin içinde yer alır.
Değerlendirme:
|
Nuclei
|
-
|
black
|
|
Erythrocytes
|
-
|
yellow
|
|
Cytoplasm
|
-
|
red
|
|
Collagen
|
-
|
blue or green
|
2. Hematoksilen Eozin
Boyama
Ksilen I 5dk (İlk ksilen parafini eritmek
için)
Ksilen II 5dk
%100 alkol 5dk
%96 alkol 5dk
%80 alkol 5dk
Distile su 5dk (suyu sakın unutma yoksa boya
almaz)
Hematoxylin 10dk
Çeşme suyunda yıkama 2dk
Asit-alkol daldırma
NaCo3 daldırma
Eozin 2-3dk
%80 alkol daldırıp hemen çıkart
%96 alkol daldırıp hemen çıkart
%100 alkol daldırıp hemen çıkart
Alkolu kurut Fön makinası ya da
açık havada
Ksilen I Daldırma (Parlaklık vermek için)
Ksilen II Daldırma
Ksilenden çıkar çıkmaz ıslakken
lamele 1 damla entellan damlar lamı yapıştır.
Hiç yorum yok:
Yorum Gönder