Prespitan halka testi
Amaç: Bir et ürünün
etiketinde belirtilen kasaplık hayvan etleri dışında başka hayvan etinin
katılıp katılmadığının tespiti amacıyla yapılır.
Prensip:
Antijen ile prespitan serumu ufak tüplerde karıştırmaksızın üst üste koyarak,
iki sıvı faz arasında maksimum yarım saatte gri-beyaz halkanın oluşup
oluşmadığını tespit etmek.
Numune alma: Steril
bıçakla etin iç kısmından yağsız
yerinden 30 g numune alınır. Dış kısım diğer etlerle muamele etmiş
olabileceğinden uygun değildir.
Alınan numune bistüri ile ince ince
kesilir ve havanda iyice ezilir.
30 g et 50-100ml steril distile su veya %0,085 lik NaCl ile 2 defa yıkanır,
süzülür
(Salam ve sosis için 50 ml, sucuk
için 60 ml %0,085 lik NaCl kullanılır)
Süzüntüden sonra süzgeç kağıdında
kalan et örneği başka bir havana alınır, üzerine 50-100 steril distile su ilave edilir, üzeri folyo ile kapatılır.
Oda ısısında 3 saat veya buzdolabında
1 gece bekletilir. 80 oC nin üzerinde pişirilmiş sucuklarda 2 gün
bekletilir. Süre sonunda ekstraksiyon sıvısı filtrasyonla süzülerek berrak hale
getirilir.
Ekstaksiyon sıvısının pH sı 6-7
arasında olmalıdır. Asidik olduğu durumlarda %1 sodyum karbonatla ayarlanır. Süzüntü
sonu elde edilen ektrakt bizim analizde kullanacağımız kısmı oluşturur.
Testin yapılışı: Test edilecek örnek ile antiserumlar oda ısısına gelene kadar bekletilir.
Bu amaçla at, tavuk, domuz ve sığır
antiserumları kullanılır.
Yukarıda hazırlanan ektrakttan 0.5 ml
alınır durhem tüplerine konur.
Üzerine pastör pipeti ile 0.5 ml pozitif
serum örneğinden alınır extract üzerine yavaşça bırakılır.
37 oC de 10-30 dk bekletilir
Değerlendirme: Süre
sonunda bu iki sıvının birleşme yerinde oluşan beyaz-gri renkli halka pozitif olarak kabul edilir.
Dikkat edilmesi gereken nokta:
*Bu metotla filogenetik olarak
birbirne yakın olan hayvan türlerinin ayrımı mümkün değildir. At eti ile eşek
eti, koyun ve keçi serumları aynı titrede reaksiyon verdiklerinden
ayrılamazlar. Bu metotla çift tırnaklı, tek tırnaklı ve poli tırnaklı ayrımı
söz konusudur.
*Prespitan halka testi, taze etlerde
yapıldığı gibi dondurulmuş, kurutulmuş, dumanlanmış, tuzlanmış ve hatta kokmuş
etlerde de yapılabilir. Sadece 80 oC nin altında ısı işlemine maruz
kalmış olması gereklidir.
*80 oC nin üzerinde ısı
işlemi görmüş etlerde bu test uygulanamaz.Yüksek ısı proteinleri koagule ve
denatüre ettiğinden pişirilmiş etlerde bu yöntem uygulanmaz.* Yüksek ısı işlemi
görmüş ürünlerde ise daha spesifik yöntemler, ELISA ve PCR uygulanabilir.
Kaynak: TS 1069/Mart1997. Et ve et
mamülleri-Laboratuar analiz metotları-Genel
Kaynak: TS 979/Ocak 1992. Salam
Hiç yorum yok:
Yorum Gönder